獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病是一種獼猴桃的毀滅性病害,不僅嚴(yán)重影響獼猴桃植株的產(chǎn)量,而且使果實(shí)的品質(zhì)大大降低;在我國(guó)還多次造成毀林毀園等嚴(yán)重后果,現(xiàn)已被列入中國(guó)森林植物檢疫對(duì)象。
本試驗(yàn)旨在從陜西不同獼猴桃種植區(qū)的健康植株的根際土壤中，分離并篩選出對(duì)獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病有較好頡頏作用的生防芽孢桿菌;并對(duì)頡頏效果較好的生防菌株進(jìn)行鑒定和發(fā)酵條件優(yōu)化;最終采用合理有效的方法應(yīng)用于田間病害的防治。 (1)為了進(jìn)一步明確陜西獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病的病原,從5個(gè)獼猴桃種植園采集的病斑組織中分離獲得1種致病菌,依照柯赫氏法則、相關(guān)培養(yǎng)特征和生理生化試驗(yàn)進(jìn)行病原鑒定,確定引起陜西獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病的病原菌是丁香假單脆桿菌獼猴桃致病變種(Pseudomonas syringae pv. Actinidiae)。 (2)本試驗(yàn)從5個(gè)獼猴桃種植園采集的25份土壤樣品中,采用在80℃處理10 min的方法,共分離獲得115株芽孢桿菌。 (3)本試驗(yàn)對(duì)所分離到的115株芽孢桿菌,采用發(fā)酵濾液的平板頡頏、單胞分離和盆栽防效試驗(yàn)進(jìn)行抑菌活性篩選,得到一株對(duì)獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病有較強(qiáng)抑菌作用的生防菌株B56-3。 (4)根據(jù)B56-3菌株的大小形態(tài)、平板培養(yǎng)特征及生理生化特性試驗(yàn),并參考相關(guān)文獻(xiàn),初步判定其為芽孢桿菌屬的枯草芽孢(Bacillus subtilis)。 (5)采用單因素分析和復(fù)合設(shè)計(jì)(正交設(shè)計(jì))的方法對(duì)B56-3菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的進(jìn)行優(yōu)化,獲得了最佳的培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件。培養(yǎng)基的組成為:葡萄糖1%蔗糖1%玉米粉3%黃豆餅粉2%酵母粉0.2% ZnSO_4·7H_2O 0.06% ,K_2HPO_4·3H_2O 0.05%;最佳的發(fā)酵條件為發(fā)酵溫度35℃,發(fā)酵液初始pH值為7.0,控制搖床轉(zhuǎn)速150 r/min,發(fā)酵時(shí)間36 h。 (6)通過(guò)皿內(nèi)生物頡頏活性測(cè)定,研究了B56-3菌株的發(fā)酵濾液的抑菌譜。結(jié)果表明,B56-3菌株的發(fā)酵濾液對(duì)棉花枯萎等5種病原真菌和大腸桿菌等2種供試細(xì)菌有較好的抑制效果。 (7)通過(guò)獼猴桃田間藥效試驗(yàn)研究,對(duì)B56-3菌株的發(fā)酵濾液田間施藥濃度和施藥方法進(jìn)行研究,結(jié)果表明發(fā)酵濾液在稀釋100倍時(shí),采用噴霧與刮除病斑涂抹相結(jié)合的方法,防治效果為86.5%。
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獼猴桃潰瘍病防治規(guī)程
評(píng)論