獼猴桃細菌性潰瘍病是一種獼猴桃的毀滅性病害,不僅嚴重影響獼猴桃植株的產(chǎn)量,而且使果實的品質(zhì)大大降低;在我國還多次造成毀林毀園等嚴重后果,現(xiàn)已被列入中國森林植物檢疫對象。
本試驗旨在從陜西不同獼猴桃種植區(qū)的健康植株的根際土壤中，分離并篩選出對獼猴桃細菌性潰瘍病有較好頡頏作用的生防芽孢桿菌;并對頡頏效果較好的生防菌株進行鑒定和發(fā)酵條件優(yōu)化;最終采用合理有效的方法應用于田間病害的防治。 (1)為了進一步明確陜西獼猴桃細菌性潰瘍病的病原,從5個獼猴桃種植園采集的病斑組織中分離獲得1種致病菌,依照柯赫氏法則、相關(guān)培養(yǎng)特征和生理生化試驗進行病原鑒定,確定引起陜西獼猴桃細菌性潰瘍病的病原菌是丁香假單脆桿菌獼猴桃致病變種(Pseudomonas syringae pv. Actinidiae)。 (2)本試驗從5個獼猴桃種植園采集的25份土壤樣品中,采用在80℃處理10 min的方法,共分離獲得115株芽孢桿菌。 (3)本試驗對所分離到的115株芽孢桿菌,采用發(fā)酵濾液的平板頡頏、單胞分離和盆栽防效試驗進行抑菌活性篩選,得到一株對獼猴桃細菌性潰瘍病有較強抑菌作用的生防菌株B56-3。 (4)根據(jù)B56-3菌株的大小形態(tài)、平板培養(yǎng)特征及生理生化特性試驗,并參考相關(guān)文獻,初步判定其為芽孢桿菌屬的枯草芽孢(Bacillus subtilis)。 (5)采用單因素分析和復合設計(正交設計)的方法對B56-3菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的進行優(yōu)化,獲得了最佳的培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件。培養(yǎng)基的組成為:葡萄糖1%蔗糖1%玉米粉3%黃豆餅粉2%酵母粉0.2% ZnSO_4·7H_2O 0.06% ,K_2HPO_4·3H_2O 0.05%;最佳的發(fā)酵條件為發(fā)酵溫度35℃,發(fā)酵液初始pH值為7.0,控制搖床轉(zhuǎn)速150 r/min,發(fā)酵時間36 h。 (6)通過皿內(nèi)生物頡頏活性測定,研究了B56-3菌株的發(fā)酵濾液的抑菌譜。結(jié)果表明,B56-3菌株的發(fā)酵濾液對棉花枯萎等5種病原真菌和大腸桿菌等2種供試細菌有較好的抑制效果。 (7)通過獼猴桃田間藥效試驗研究,對B56-3菌株的發(fā)酵濾液田間施藥濃度和施藥方法進行研究,結(jié)果表明發(fā)酵濾液在稀釋100倍時,采用噴霧與刮除病斑涂抹相結(jié)合的方法,防治效果為86.5%。
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